凱氏定氮儀測定小米中蛋白質(zhì)含量

前言

小米，原名：粟，也稱作粱、狗尾草、黃粟、粟米。蛋白質(zhì)含量在不同類型的小米中變動(dòng)很大，一般介于5%—20%之間，平均為10%—12%。小米中蛋白質(zhì)的質(zhì)量常優(yōu)于小麥、稻米和玉米，但是必需氨基酸中的賴氨酸含量低。現(xiàn)在我們根據(jù)《GB 5009.5-2016 食品安家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》對小麥中的蛋白質(zhì)進(jìn)行測定。

實(shí)驗(yàn)部分

1.1實(shí)驗(yàn)原理

      小米中的有機(jī)態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下，轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾，使氨析出，用硼酸吸收后，再以鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液進(jìn)行滴定。

1. 2 儀器與設(shè)備

K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀

SH 420F 石墨消解儀

1. 3 試劑與耗材

實(shí)驗(yàn)中涉及到的試劑，均為優(yōu)級純或分析純；實(shí)驗(yàn)用水為無氨蒸餾水。

1.3.1 鹽酸或硫酸溶液：c(H ⁺ )= 0 . 1mol /L ，標(biāo)準(zhǔn)滴定液。

1. 3 . 2 硼酸溶液：質(zhì)量分?jǐn)?shù) 2% 。

1. 3. 3 氫氧化鈉溶液：質(zhì)量分?jǐn)?shù) 40% 。

1. 3. 4 溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑：將溴甲

酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 ： 1 體積比臨時(shí)混合搖勻備用。

1. 3 . 5 催化劑片： 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合均勻壓片

1. 4 實(shí)驗(yàn)過程

1 . 4 . 1 取樣

將小米研磨后，稱量0.5g 的樣品（至 0 . 1mg ），加催化劑一片（或硫酸鉀 5g 與硫酸銅 0 . 5g) ，再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL 。

1 . 4 .2 消解

利用石墨消解爐進(jìn)行消解，將消化管放在石墨爐上，蓋上排氣罩，連接廢氣吸收系統(tǒng)，設(shè)定消解溫度參數(shù)如下表：

消化完畢后，將消化管取下冷卻。

1 . 4 . 3 上機(jī)測試

待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后，將消化管放置于定氮儀上，開始蒸餾滴定。定氮儀設(shè)置程序如下：

式中：M-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度（mol/L)

 W-樣品質(zhì)量（g）

 V0-樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL）

 V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL）

5.83-樣品蛋白系數(shù)

結(jié)果與討論